貨號：MG2255

儲存：-80℃ 保存，避免反復凍融。保質期2年

1. 產品簡介

基質膠是從Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 小鼠肉瘤提取的可溶性細胞培養基質，含有豐富的細胞外基質蛋白，主要包括層粘連蛋白、膠原IV、肝素硫酸酯蛋白聚糖、巢蛋白以及大量的生長因子。

基底膠在室溫條件下，聚合形成具有生物學活性的三維基質，模擬體內細胞基底膜的結構、組成、物理特性和功能，有利于體外細胞的培養和分化，以及對細胞形態、生化功能、遷移、侵染和基因表達的研究。基質膠也適用于類器官生長、分化、代謝和毒理學研究。高濃度的基質膠可以用于動物體內成瘤實驗的細胞包被。

本款基質膠針對類器官培養進行了特別優化，在總蛋白濃度不變的條件下，調整了層粘連蛋白和部分生長因子等組分的比例，提升了培養類器官的成功率和穩定性。         

2. 操作方法

2.1類器官培養方法

1. 用適量的4℃過夜解凍的基質膠重懸細胞或組織沉淀，推薦重懸密度為每 50μL基質膠懸液包含 1X10⁵細胞，重懸后可置于冰上，重懸時間不超過 30s 以避免基質膠過早凝固。基質膠稀釋比例應在 70%以上以保證培養過程中基質膠的結構穩定性。

2. 將基質膠和組織細胞的混合懸液點入預熱的24 孔板底部正中央，每孔 30μL 左右，避免懸液接觸孔板側壁。為防止基質膠室溫凝固，此步驟應盡快完成。

3. 將接種完成后的培養板至于 37℃二氧化碳恒溫培養箱中，孵育 15min 左右待基質膠凝固。

4. 待基質膠wan全凝固后，沿壁緩慢加入類器官培養基，24 孔板每孔 500uL，避免破壞已凝固結構。

5.將 24 孔板置于 37℃二氧化碳培養箱中培養。

6.每 3 天更換一次培養基，更換培養基時應避免破壞基質膠。

2.2 胚胎干細胞 ES 和誘導多能干細胞 ips cell培養

1. 在冰上解融一份分裝的基質膠。

2. 在50 mL離心管中加入24 mL的預冷的DMEM/F-12，并且放在冰上。

3. 將解融的基質膠按一定比例（如1:100）加入到預冷的 DMEM/F-12中（在50 mL離心管中），混勻。

4. 稀釋好的基質膠溶液必須立即使用，進行培養皿的包被。推薦的包被體積參見下表。

5. 輕輕晃動培養皿，將基質膠溶液均勻的覆蓋到培養皿的表面。

注意：如果培養皿的表面沒有被基質膠溶液wan全覆蓋，則不能用于人ES和iPS細胞培養。

6. 培養皿使用前至少在室溫(15 - 25°C)孵育1個小時，不可使基質膠蒸發。

注意事項：

1.收到產品并確認到貨情況無異常后，請將基質膠儲存于--80℃冰箱，短暫使用可置于-20℃冰箱。切勿將基質膠儲存于自動除霜的冰箱中。在第一次融化后請分裝保存，應避免基質膠反復凍融。

2.因基質膠在 10℃以上即可成膠，在操作過程中，保持基質膠一直置于冰上，所有接觸的細胞培養器皿，移液吸頭，分裝管等都必須預冷后使用。

3.所有操作均需在無菌環境下進行，試劑瓶瓶蓋可用 70％乙醇擦拭，并自然干燥。應使用預冷的移液器以保證基質膠呈勻漿狀。

4.溶解時可將基質膠基質置于 4℃冰箱內冰上過夜溶解。成膠后基質膠可以在 4℃ 24－48 小時后重新呈液態。